Епиталон(линк:хттпс://ввв.блоомтецхз.цом/синтхетиц-цхемицал/пептиде/епиталон-повдер-цас-307297-39-8.хтмл) је пептидни молекул за који се сматра да има добру биолошку активност и потенцијалну лековиту вредност. Тренутно су истраживања епиталон пептида углавном фокусирана на његову примену као агенса против старења.
Епиталон може да продужи дужину теломера на крајевима хромозома активацијом теломеразе, чиме позитивно утиче на пролиферацију и регенерацију матичних ћелија. Истраживања су показала да Епиталон може значајно да инхибира штетан оксидативни стрес, смањи оштећење ДНК и регулише експресију фактора раста сличног инсулину-1 (ИГФ-1) и коначно постигне ефекат смањења брзине старење и продужење животног века.
Поред тога, Епиталон такође има имуномодулаторне и неуропротективне ефекте. Епиталон може побољшати људски имунитет и промовисати препознавање и уклањање хетерогених и само-антигена од стране тела. Поред тога, Епиталон такође може да смањи смрт неуронских ћелија и неуродегенерацију, чиме се постижу неуропротективни ефекти. Епиталон такође има антиканцерогене ефекте и делује тако што регулише ћелијски циклус, промовише апоптозу ћелија и инхибира пролиферацију туморских ћелија.
|
|
|
Епиталон је појачивач тела, полипептидно једињење које се састоји од четири аминокиселине аланина (Ала), глутаминске киселине (Глу), аспарагина (Асп) и лизина (Лис). Методе синтезе Епиталона се углавном деле на хемијску синтезу и биосинтезу.
Метода хемијске синтезе:
Епиталон је пептид састављен од четири аминокиселине са молекулском формулом Ц14Х22Н4О9. Епиталон може да подстакне ослобађање људског хормона раста, чиме помаже у одлагању старења, побољшању сна и побољшању имунитета.
1. Припрема реактаната:
Реактанти за синтезу Епиталона укључују четири аминокиселине, аланин (Ала), глутаминску киселину (Глу), аспарагин (Асп) и лизин (Лис), као и ацилирајуће реагенсе као што су Боц-Лис-ОтБу и Асп(ОтБу) 2 и тако даље. Чистоћа ових аминокиселина и реагенаса мора бити већа од 99 процената, иначе ће бити угрожен квалитет производа.
2. Кораци хемијске синтезе
2.1 Синтеза аланин-4-хидроксибутерног анхидрида (Ала-Хип):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 посто чистоће.
2.2 Синтеза Ала-Хип-Глу-ОтБу:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 посто
2.3 Синтеза Епиталона:
Додајте Асп(ОтБу)2 и Боц-Лис-ОтБу у систем реакције кондензације унапред дизајнираним редоследом и подвргните вишеструким реакцијама кондензације да бисте добили Епиталон. Процес је следећи:
а. Групна реакција за уклањање заштите:
Прво је уклоњена заштита Асп(ОтБу)2, а заштитна група Асп(ОтБу)2 је уклоњена коришћењем натријум хидроксида (НаОХ) и трихлоросирћетне киселине (ТЦА) да би се створиле Асп структурне јединице и истовремено ослободио БуОт. Време реакције је било 1 сат, а температура је била собна температура. После реакције, спровести кисело-базну неутрализацију, додати велику количину засићеног раствора натријум хлорида, затим исталожити етанолом и осушити у вакууму да би се добио Асп као бела чврста супстанца.
б. Реакција кондензације:
Додајте Асп и Ала-Хип-Глу-ОтБу у систем реакције кондензације, а затим извршите више реакција кондензације да бисте добили Епиталон. Овај процес треба да се уради кроз различите третмане.
Први корак: уклоните Ала-Хип заштитну групу:
Прво, Ала-Хип-Глу-ОтБу је растворен у метанолу, додани су трихлоросирћетна киселина (ТЦА) и вода да би се уклонила Хип-ОтБу заштитна група која се користила за заштиту амино групе за стварање Ала-Хип-Глу-ОХ. Реакција треба да се изведе на собној температури, а реакциони раствор се третира са НаОХ након реакције да би се неутралисала киселост.
Други корак: уклоните Глу-ОтБу заштитну групу:
Затим, након темељног сушења, Ала-Хип-Глу-ОХ је помешан са Боц-Лис-ОтБу, поново су додати трихлоросирћетна киселина и вода и реакција је изведена на собној температури. Ова реакција уклања Глу-ОтБу заштитну групу да би се створио Ала-Хип-Глу-Лис(Боц)-ОтБу.
Трећи корак: уклоните Лис заштитну групу:
Коначно, додавањем трихлоросирћетне киселине, воде и метанола уклања се Боц-Лис-ОтБу заштитна група да би се добио Епиталон. Реакција треба да се изведе на собној температури, а реакциони раствор се третира са НаОХ након реакције да би се неутралисала киселост.
3. Анализа резултата:
Коначно се добија производ Епиталон који се може карактерисати и пречистити различитим аналитичким методама. На пример, параметри као што су чистоћа, нечистоће и тежина могу се одредити коришћењем метода пречишћавања као што су Европска фармакопеја (ЕП) или Фармакопеја Сједињених Држава (УСП).
4. Резиме:
Епиталон је боостер за тело састављен од четири аминокиселине аланина, глутаминске киселине, аспарагина и лизина. Метода хемијске синтезе Епиталона углавном укључује методу синтезе у чврстој фази и методу синтезе у течној фази, које треба да повежу различите аминокиселине заједно кроз вишестепене реакције. Овај процес захтева пажљиву контролу услова реакције и техника пречишћавања како би се обезбедили производи високе чистоће.
Биосинтетички метод:
Метода биосинтезе је коришћење биокатализе микроорганизама или синтетичких ензима за припрему Епиталона, укључујући ферментацију и ензимску катализу.
1. Метода ферментације: Метода ферментације је биосинтетичка метода која користи трансгени микроорганизам Есцхерицхиа цоли за експресију Епиталона. Прво, ставите секвенцу гена Епиталон у Есцхерицхиа цоли и масовно га култивишите за експресију. Затим се користе различите технике пречишћавања као што су јоноизмењивачка хроматографија и гел хроматографија да би се коначно добили чисти производи. Конкретни кораци су следећи:
1.1 Изаберите одговарајућу бактерију домаћина:
Да би се синтетизовао Епиталон, потребно је одабрати одговарајући сој домаћина за експресију. Често коришћене бактерије домаћина укључују Есцхерицхиа цоли (Есцхерицхиа цоли), квасац (Саццхаромицес церевисиае) и гљивице (Аспергиллус оризае). Приликом одабира бактерија домаћина, потребно је размотрити да ли бактерије домаћини имају способност да ефикасно синтетишу протеине, да ли могу правилно да савијају и модификују протеине и да ли могу да производе циљне производе високог приноса.
1.2 Дизајнирајте секвенцу гена и клон:
Након одабира бактерије домаћина, секвенца гена Епиталон (укључујући секвенце аланина, глутаминске киселине, аспарагина и лизина) треба да се убаци у бактерију домаћина помоћу технологије ДНК рекомбинације. Типично, секвенца гена се клонира у експресиони вектор који укључује елементе као што су секвенце промотера и терминатора и селектабилни антибиотски маркер.
1.3 Експресија и пречишћавање:
Након што је клонирање завршено, експресиони вектор се трансформише у бактерију домаћина, а затим култивише. Током процеса култивације, бактерија домаћин ће синтетизовати Епиталон према секвенци гена у експресионом вектору. Када се производ произведе у довољној количини, може се изоловати из ћелија различитим методама пречишћавања и добија се Епиталон високе чистоће.
2. Метода катализована ензимима: Метода катализована ензимима је да се Епиталон синтетише повезивањем различитих амино киселина са различитим ензимима. На пример, Л-глутамат-5-аминаза се користи да катализује реакцију глутамата и бутирата за синтезу Глу-ОтБу. Затим користите Л-аспарагиназу да катализујете реакцију кондензације аспарагина и Ала-Хип-Глу-ОтБу да бисте добили Епиталон.
Методе синтезе Епиталона се углавном деле на хемијску синтезу и биосинтезу. Хемијска синтеза је тренутно најчешће коришћена метода синтезе Епиталона. Биосинтеза је припрема Епиталона кроз биокатализу микроорганизама или синтетичких ензима, укључујући ферментацију и ензимску катализу. Иако биосинтетичке методе имају велики потенцијал, и даље су потребна даља истраживања и оптимизација. Епиталон је потенцијални лек са широким перспективама примене, који се може користити у областима против старења, регулације имунитета, неуропротекције и лечења карцинома. Истовремено, Епиталон се такође може користити као здрава храна и производ за здравствену његу како би помогао потрошачима да се одупру старењу, побољшали имунитет и смањили ризик од болести. Иако је истраживање о Епиталону тек у повоју, верује се да ће дубинским истраживањем његовог механизма и функције Епиталон постати важан лек и производ за здравствену заштиту.